個々の細胞のDNA損傷を直接検出するコメットアッセイを行うためのキットです。スライド，アガロースおよび試薬が含まれています。
また，正常な浮遊細胞（CC0）と，異なる条件下でEtoposide処理してDNAに損傷を与えた3種類の細胞（CC1～CC3）をセットにしたCometAssay Control Cellもあります。コメットアッセイを行う際に本製品を用い，研究者および研究室間での電気泳動の条件を標準化することで，得られた結果を比較することができます。
※コメットアッセイ用の電気泳動装置についてはこちらをご覧下さい。
MEMO
コメットアッセイとは
細胞をアルカリ処理で加水分解した後，そのままスライド上で電気泳動すると，アポトーシスを起こした細胞の断片化DNAは核外へ移動します。これを蛍光色素（SYBR（R） Goldなど）で染色すると，彗星状の“Comet Tail”パターンを示します（写真左）。一方，正常細胞のスーパーコイルDNAは加水分解処理の影響を受けず，核内に留まります（写真右）。このパターンの違いにより，個々の細胞のアポトーシスを検出します。
この“Comet Tail”の長さや形はDNA損傷の程度と相関関係があるため，画像解析装置と組み合わせることで，損傷レベルの評価を定量的に行うことが可能です。
CometSlide 2 well (#4250-050-K)
（※原寸ではありません）
CometSlide 96 well (#4253-096-K)
CometAssay Control Cellを用いたコメットアッセイ
それぞれの細胞でのComet TailからDNA損傷のレベルを評価した。
CC0：＜1％，CC1：21％，CC2：44％，CC3：67％
CometAssay Webinar
特 長
- Comet Tailは一本鎖・二本鎖DNAの両方と結合する蛍光色素（SYBR（R） Goldなど）で染色し，検出します。
- CometSlideを使用することにより，アガロースの基底層を作製するなどの前処理を必要とせず，低融点（LM）アガロースを直接加えることができます。また，細胞を直接スライドに添加できます。
- CometSlideの試料処理面の数が異なる（2, 20, 96 well）3種類のキットがあります。
- DNAに損傷を与える物質や，紫外線，電離放射線などの影響を簡単に調べることができます。
- アポトーシスの研究以外に，DNA修復酵素の作用を調べる場合にも有用です。
※SYBR（R）はLife Technologies社の登録商標です。
操作方法概略
1.正常細胞，またはDNA損傷剤やアポトーシス誘導剤で処理した細胞の懸濁液を，融解したLM Agarose（42℃）と混ぜる。
2.細胞／アガロースをCometSlide上にピペットで均一に広げ，固定化する。
3.スライドをLysis solution中に浸す。
4.スライドをアルカリ性電気泳動用バッファー中に移してDNAの加水分解（20～60分間）を行った後，電気泳動により分離する。
5.中和後，蛍光色素で染色し，FITCフィルターを用いて落射型蛍光顕微鏡（425～500 nm）で観察する。
※各種修飾酵素で処理した試料でコメットアッセイを行うことにより，アポトーシス以外のDNA損傷を検出するキット（FLARE Assay Kit / FLARE Module）も取り扱っています。詳細は，当社テクニカルサポート（試薬担当）までお問い合わせ下さい。
※電気泳動には，TREVIGEN社のコメットアッセイ用電気泳動装置のご使用をお勧めします。詳細はフナコシホームページをご覧下さい。
※蛍光色素はSYBR（R） Goldのご使用をお勧めします。
キット内容
- Lysis solution
- Comet LM agarose
- CometSlide（2 well : #4250-050-Kのみ）
- CometSlide HT（20 well : #4252-040-Kのみ）
- CometSlide 96（96 well : #4253-096-Kのみ）
- EDTA
※キットには蛍光色素は含まれていません。別途ご用意下さい。
※キット別売品も取り扱っています。詳細は，当社テクニカルサポート（試薬担当）までお問い合わせ下さい。
| メーカー | 商品コード | 商品名 | 包装 | 価格 | 在庫 | リスト |
|---|---|---|---|---|---|---|
| TRZトレビジェン TREVIGEN, Inc. | 4250-050-K | CometAssay Kit (50samples) | 1kit | \52,000 | 2個以上 | 追加 |
| TRZトレビジェン TREVIGEN, Inc. | 4252-040-K | CometAssay HT Sample Kit (40samples) | 1kit | \52,000 | 無 (未発注) | 追加 |
| TRZトレビジェン TREVIGEN, Inc. | 4253-096-K | CometAssay 96 Kit (96samples) | 1kit | \52,000 | 無 (未発注) | 追加 |
| メーカー | 商品コード | 商品名 | 包装 | 価格 | 在庫 | リスト | |||||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| TRZトレビジェン TREVIGEN, Inc. | 4250-050-K | CometAssay Kit (50samples) | 1kit | \52,000 | 2個以上 | 追加 | |||||||||||||||
| 説明文 | 個々の細胞のDNA損傷を直接検出するコメットアッセイを行うためのキットです。染色パターンの違いによりアポトーシスを検出します。 | ||||||||||||||||||||
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| 掲載カタログ | ニュース 2014年10月15日号 p.23 | ||||||||||||||||||||
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| TRZトレビジェン TREVIGEN, Inc. | 4252-040-K | CometAssay HT Sample Kit (40samples) | 1kit | \52,000 | 無 (未発注) | 追加 | |||||||||||||||
| 説明文 | 個々の細胞のDNA損傷を直接検出するコメットアッセイを行うためのキットです。染色パターンの違いによりアポトーシスを検出します。 | ||||||||||||||||||||
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| 掲載カタログ | ニュース 2014年10月15日号 p.23 | ||||||||||||||||||||
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| TRZトレビジェン TREVIGEN, Inc. | 4253-096-K | CometAssay 96 Kit (96samples) | 1kit | \52,000 | 無 (未発注) | 追加 | |||||||||||||||
| 説明文 | 個々の細胞のDNA損傷を直接検出するコメットアッセイを行うためのキットです。染色パターンの違いによりアポトーシスを検出します。 | ||||||||||||||||||||
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| 掲載カタログ | ニュース 2014年10月15日号 p.23 | ||||||||||||||||||||
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関連製品
| メーカー | 商品コード | 商品名 | 包装 | 価格 | 在庫 | リスト |
|---|---|---|---|---|---|---|
| TRZトレビジェン TREVIGEN, Inc. | 4256-010-CC | CometAssay Control Cell (10assays) | 1set | \37,000 | 無 (未発注) | 追加 |
| TRZトレビジェン TREVIGEN, Inc. | 4254-200-K | CometAssay Silver Staining Kit (200 samples) | 1kit | \37,000 | 無 (未発注) | 追加 |
| TRZトレビジェン TREVIGEN, Inc. | 4250-050-ESK | CometAssay Electrophoresis Starter Kit II | 1set | \445,000 | 無 (未発注) | 追加 |
| メーカー | 商品コード | 商品名 | 包装 | 価格 | 在庫 | リスト | |||||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| TRZトレビジェン TREVIGEN, Inc. | 4256-010-CC | CometAssay Control Cell (10assays) | 1set | \37,000 | 無 (未発注) | 追加 | |||||||||||||||
| 説明文 | CometAssay Kit用コントロール細胞のセットで,正常な浮遊細胞とDNA損傷レベルの異なる３種類の細胞を含む。 | ||||||||||||||||||||
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| 掲載カタログ | ニュース 2014年10月15日号 p.23 | ||||||||||||||||||||
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| 説明文 | コメットアッセイの結果を銀染色により検出するキット。CometAssay Kitでは，発光時間が短い蛍光色素を用いて検出するため，迅速に解析する必要があるが，本キットを使用すれば，結果を銀染色像として半永久的に保存できる。 | ||||||||||||||||||||
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| 掲載カタログ | ニュース 2014年10月15日号 p.23 | ||||||||||||||||||||
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| 説明文 | セット内容：CometAssay Electrophoresis SystemII（#4250-050-ES），CometAssay Kit（#4250-050-K），CometAssay Control Cell（#4256-010-CC） | ||||||||||||||||||||
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| 掲載カタログ | ニュース 2014年10月15日号 p.23 | ||||||||||||||||||||
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コメットアッセイ・プレゼンテーション
TREVIGEN社では，コメットアッセイについて分かりやすく解説したプレゼンテーションを，ホームページにて公開しています。こちらからダウンロードしてご覧いただけます。
図中に示した各レポーターベクターについて，導入された細胞をTO-901317で処理し，ルシフェラーゼアッセイを行った。アゴニストの濃度依存的に，ルシフェラーゼ活性が上昇している。
