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Channel: 特集|研究用試薬・抗体・機器・受託サービス フナコシ株式会社
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ExoQuick Exosome Precipitation Solution

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血清,腹水などの体液試料や細胞培養液から,高純度かつ高収量のExosome(エキソソーム,エクソソーム)を,簡便に濃縮できる試薬です。数多くの使用実績があります。
血清,腹水試料用のExoQuickと,尿,髄液や細胞培養液試料用のExoQuick-TCがあります。

本製品は研究用です。臨床用途には使用できません。


MEMO

Exosome(エキソソーム,エクソソーム)とは


Exosome(エキソソーム,エクソソーム)は生体内の細胞および培養細胞から分泌される40~100 nmの膜小胞で,血液,尿,羊水,腹水などの体液や細胞培養液中に存在します。

Exosome(エキソソーム,エクソソーム)中に含まれるmiRNAやタンパク質は,分泌する細胞の種類や生理条件により異なります。そのため,エキソソーム中のmiRNAやタンパク質の分析は,各種疾患に関与する新たなバイオマーカーの探索に有用です。

Exosome(エキソソーム,エクソソーム)中のmiRNAやタンパク質の詳細については,ExoCartaデータベースをご覧下さい。


エキソソーム(エクソソーム)濃縮用試薬 ExoQuick Exosome Precipitation Solution

ExoQuickを用いて血清から単離したExosome(エキソソーム,エクソソーム)の電子顕微鏡写真

Exosome(エキソソーム,エクソソーム)濃縮試薬の特長

  • わずか250μlの血清や腹水試料から,エキソソームを濃縮することが可能です。
  • 超遠心,抗体結合磁気ビーズ,クロマトグラムを用いた従来法よりも,簡便かつ効率的に単離できます。
  • 本製品で濃縮したExosome(エキソソーム,エクソソーム)から精製したmiRNAは,MicroRNA qPCR Array with QuantiMirや,SeraMir Exosome RNA Amplification Kitによる正確なmiRNAプロファイリングに有用です。また,抽出したタンパク質は,電気泳動などによる解析に有用です。
  • 多数の論文で使用実績があります。

Exosome(エキソソーム,エクソソーム)濃縮試薬の操作方法概略

1. 試料を3,000×gで15分間遠心分離し,更に細胞や細胞破片を除去する。

2. 上清を滅菌チューブに移し,ExoQuickまたはExoQuick-TCを加える(表参照)。

3. 4℃で静置する(表参照)。

4. 1,500×gで30分間遠心分離すると,Exosome(エキソソーム,エクソソーム)が薄黄色~白色のペレットとして沈殿する。上清を吸引除去する。

5. 再度,1,500×gで5分間遠心分離後,残った上清を吸引除去する。

6. 滅菌蒸留水を加えて,Exosome(エキソソーム,エクソソーム)を溶解させる。

ExoQuickの添加量

試料の種類 試料量 ExoQuickの添加量 静置時間
血 清 250μl 63μl 30分間
腹 水 250μl 63μl 一晩(12時間以上)

ExoQuick-TCの添加量

試料の種類 試料量 ExoQuick-TCの添加量 静置時間
尿 5 ml 1 ml 6時間~一晩
髄 液 5 ml 1 ml 6時間~一晩
細胞培養液 5 ml 1 ml 6時間~一晩
エキソソーム(エクソソーム)濃縮用試薬 ExoQuick Exosome Precipitation Solution

ExoQuickを用いてヒト血清から単離したエキソソーム画分のタンパク質およびRNAを解析した。
左:単離したExosome(エキソソーム,エクソソーム)画分を電気泳動後,Exosome(エキソソーム,エクソソーム)のバイオマーカーであるCD63, CD9, CD81, HSP70をウエスタンブロッティングで検出した。
右:Exosome(エキソソーム,エクソソーム)画分(EXO)と上清画分(SUP)からRNAを精製後,15%ポリアクリルアミド RNA用ゲルで電気泳動し,SYBR(R) GreenでRNAを検出した。

ExoQuick Exosome Precipitation Solution

他社類似製品とのExosome(エキソソーム,エクソソーム)収量の比較

ExoQuick / ExoQuick-TCとA社製品を用いて,ヒト血清および細胞培養液からExosome(エキソソーム,エクソソーム)を濃縮し,CD63 ExoELISA Kit(SBI社,#EXOEL-CD63A-1)を用いてエキソソーム数を測定した。ExoQuick / ExoQuick-TCの方が,Exosome(エキソソーム,エクソソーム)の収量が多いことがわかる。
左図 試料:ヒト血清(500μl)
右図 試料:PC-3前立腺がん細胞を7日間培養した,Exosome(エキソソーム,エクソソーム)除去FBS(Exo-FBS,SBI社)を含むDMEM培地

エキソソーム(エクソソーム)濃縮用試薬 ExoQuick Exosome Precipitation Solution

ヒト卵巣がん患者の腹水をExoQuickまたは抗体結合磁気ビーズで濃縮したものおよび,濃縮前のものからRNAを精製し,Bioanalyzer(Agilent社)で解析した。
データ提供:Dr. Douglas Taylor, Louisville 大学,KY

エキソソーム(エクソソーム)濃縮用試薬 ExoQuick Exosome Precipitation Solution

ExoQuick-TCを用いて,ヒト由来細胞の培養液およびヒト尿試料からExosome(エキソソーム,エクソソーム)を濃縮した。得られたExosome(エキソソーム,エクソソーム)について,NanoSight LM10(NanoSight社)を用いて粒径の分布と濃度を測定した。

使用文献

1. Gu, Y., et al., PLoS ONE, 7 (8), e43691 (2012).
2. Umezu, T., et al., Oncogene, Jul. 16 (2012). [Epub ahead of print]
3. Chang, Y. H., et al., Mol. Cell. Proteomics, Aug. 15 (2012). [Epub ahead of print]
4. Kurt, W., et al., FEBS Letters, Aug. 8. (2012). [Online]
5. Epple, L. M., et al., PLoS ONE, 7 (7), e42064 (2012).
6. Bala, S., et al., Hepatology, Jun. 9 (2012). [Epub ahead of print]
7. Akbas, F., et al., Exp. Lung Res., 38 (6), 286~294 (2012).
8. Alvarez, M. L., et al., Kidney Int., Jul. 11 (2012). [Epub ahead of print]
9. Zhuang, G., et al., EMBO J., 31 (17), 3513~3523 (2012).
10. Saludes, J. P., et al., ACS Chem. Biol., Jul. 6 (2012). [Epub ahead of print].
11. Fabbri, M., et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA., 109 (31), 12278~12279 (2012).
12. Singh, P. P., et al., J. Immunol., Jun. 20 (2012). [Epub ahead of print]
13. Kadiu, I., et al., J. Immunol., 189 (2), 744~754 (2012).
14. Wang, G., et al., J. Biol. Chem., 287 (25), 21384~21395 (2012).
15. Surgucheva, I., et al., Biochemistry, 51 (23), 4743~4754 (2012).
16. Toyofuku, T., et al., Genes Dev., 26 (8), 819~829 (2012).
17. Xiaowei, Z., et al., PLoS ONE, 7 (3), e32765 (2012).
18. Zhou, Q., et al., Int. J. Biol. Sci., 8, 118~123 (2012).
19. Yaron, G., et al., Eur. J. Heart Fail., 14 (2), 147~154 (2012).
20. Haney, M. J., et al., Nanomedicine (Lond.), 7 (6), 815~833 (2012).
21. Da, Silveira, J. C., et al., Biol. Reprod., 86 (3), 71 (2012).
22. Hartman, Z. C., et al., Vaccine, 29 (50), 9361~9367 (2011).
23. Douglas, D., et al., Molecular Biology, 728 (4), 235~246 (2011).
24. Karolina, D. S., et al., PLoS ONE, 6 (8), e22839 (2011).

その他にも多数使用文献はございます。使用文献はこちら。

サンプルあります!
#EXOQ5A-1,#EXOQ20A-1,#EXOTC10A-1,#EXOTC50A-1は,小包装のサンプル品をご用意しています。ご希望の方は,当社テクニカルサポート(試薬担当)までお問い合わせ下さい。

[在庫 : 2014年02月11日 16時50分 現在]
メーカー 商品コード 商品名 包装 価格 在庫 リスト
SBIシステムバイオサイエンス
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EXOQ5A-1

Exosome Precipitation Solution, ExoQuick (75reactions)

5ml

\48,0002個以上追加
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EXOQ20A-1

Exosome Precipitation Solution, ExoQuick (300reactions)

20ml

\155,0001個追加
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Exosome Precipitation Solution, ExoQuick-TC (10reactions)

10ml

\39,0002個以上追加
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Exosome Precipitation Solution, ExoQuick-TC (50reactions)

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血清,腹水からエキソソームを濃縮する試薬。

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ニュース 2012年12月1日号 p.6

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尿,髄液,細胞培養液からエキソソームを濃縮する試薬。

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Exosome Precipitation Solution, ExoQuick-TC (50reactions)

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尿,髄液,細胞培養液からエキソソームを濃縮する試薬。

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ExoQuickにRNA精製用カラムおよび試薬をセットにした製品です。

体液試料に含まれるExosome(エキソソーム,エクソソーム)中のmiRNAから,定量的RT-PCR用の一本鎖cDNAおよびT7 in vitro転写用の二本鎖cDNAを合成できます。体液試料からExosome(エキソソーム,エクソソーム)を分離し,これに含まれるExosome(エキソソーム,エクソソーム)RNA(exoRNA)をスピンカラムにより精製した後,両端にタグを付加した定量的PCR用およびin vitro転写用のcDNAを合成します。

詳細についてはフナコシホームページをご覧いただくか,当社テクニカルサポート(試薬担当)までお問い合わせ下さい。


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