組織・培養細胞の剥離／分離／分散溶液　Accutase／Accutase LZ

接着細胞の剥離や，組織から初代培養細胞を分離，分散させるのに適した調製済み試薬です。ヒトES細胞，ヒト間葉系幹細胞(human mesenchymal stem cell)，ヒト神経幹細胞（human neural stem cell)などにおける使用実績があります。
溶液状でReady-to-useのAccutaseと，凍結乾燥粉末状のAccutase LZがあります。

※Accutaseのサンプルをご用意しています。サンプルをご希望の方は当社テクニカルサポート（下記参照）までお問い合わせ下さい。


Accutase（溶液）	Accutase LZ（凍結乾燥粉末）

組織・培養細胞の剥離／分離／分散溶液「Accutase」の特長

プロテアーゼ活性とコラゲナーゼ活性が最大限に効果を発揮するように組み合わせてあります。
穏やかかつ迅速に作用するので，高い細胞生存率を示します。
哺乳動物細胞や微生物由来の物質は含んでいません。
AccutaseはDulbecco’s PBS（0.5 mM EDTA･4Na，フェノールレッド含有）で調製済みのReady-to-useフォーマットです。
Accutase LZは凍結乾燥品で，省スペースで保管できます。蒸留水を加えて溶解し，ろ過滅菌を行って調製します。1バイアルで500 mlのAccutaseが調製できます。調製方法は下記をご覧下さい。
反応停止や中和操作は不要です。
Accutaseを用いて剥離，分散させた細胞は，様々なアプリケーションに使用できます。

品名	Accutase	Accumax （関連製品）
製品外観
酵素活性	標準	強め
反応停止，中和操作	不要
動物・微生物由来成分	不含
フェノールレッド	含有	不含

アプリケーション例

バイオリアクターによる細胞の大量培養
細胞の継代
フローサイトメトリー
細胞表面マーカーの解析
血清飢餓による細胞周期同調
がん遺伝子導入による形質転換
ウイルス増殖試験
神経冠細胞移動アッセイ
細胞増殖アッセイ
細胞の接触走性アッセイ
腫瘍細胞の遊走アッセイ

使用実績のある細胞

線維芽細胞	ケラチノサイト	血管内皮細胞
血管平滑筋細胞	肝細胞	肝前駆細胞
ヒトES細胞（human embryonic stem cell)	ヒト間葉系幹細胞 (human mesenchymal stem cell)	ヒト神経幹細胞（human neural stem cell)
ニワトリ初代培養神経細胞	骨髄幹細胞	マクロファージ
マウス精巣胚細胞	293	3T3
A375	BHK	CHO
COS	D54	HeLa
HT1080	L929	M24
NT2	MG63	U251
Sf9	Vero

Accutaseによる細胞の剥離
培養用ディッシュを用いてDMEM（10％ FBS含有）培地で培養したヒト線維肉腫MG63細胞を，Accutaseを用いて剥離した。Accutase処理時間を変えて細胞を回収して計数を行い，細胞生存性を測定した。Accutaseでの処理により，迅速に細胞剥離が起こり（処理後5分），単一細胞に分散し，その後の細胞生存性も高いことがわかる。Accutaseは穏やかに作用するため，45分間処理した細胞でも，97±3％と高い生存性を有していた。

組織・培養細胞の剥離／分離／分散溶液 Accutaseにより剥離したhES細胞の凍結後の生存性

Accutaseにより剥離したhES細胞の凍結後の生存性
ヒトES細胞を培養後，Accutaseまたはコラゲナーゼで剥離し，凍結保存した。液体窒素中で2か月間保存後に播種し，1日後に全細胞数と生存細胞数を計数した。Accutaseで剥離処理を行った細胞（緑色）の方が，コラゲナーゼで剥離を行った細胞（青色）よりも，凍結保存後の生存細胞数が多いことがわかる。

組織・培養細胞の剥離／分離／分散溶液「Accutase」の操作方法概略

※操作はすべて滅菌条件下で行って下さい。

接着性細胞を培養している容器から，培地を吸引除去する。
細胞全体を覆う量のAccutaseを添加する。
約5～10分間静置する。
顕微鏡下で細胞を観察し，細胞の形態が球状となって軽く浮遊していることを確認したら，容器の縁を何回かタッピングする（または穏やかに数回ピペッティングを行う）。
細胞数を計数し，継代する。酵素阻害物質の添加や洗浄は不要。

Accutase LZの調製方法概略

400 mlの室温または冷蔵蒸留水を用意し，500 mlメスシリンダーに入れる。
Accutase LZのバイアルのふたを外し，冷蔵蒸留水40 mlを加える。ふたを閉めて1～2分間ボルテックスまたは転倒撹拌を行い，溶解させる。
ピペットを用いてバイアル中のAccutase溶液をメスシリンダーに移す。
空になったバイアルに25 mlの冷蔵蒸留水を加え，すすいだ後，同様に溶液をメスシリンダーに移す。これをもう一度繰り返す。
メスシリンダーに冷蔵蒸留水を加え，500 mlまでメスアップする。
パラフィルムなどでメスシリンダーに封をして，転倒撹拌を複数回行い混合する。
0.22μm のフィルターを用いてろ過滅菌を行う。セルロースメンブレンなど，タンパク質付着性の低いフィルターを用いる。
調製したAccutase溶液は，冷蔵（2～8℃）で約2か月保存可能。

Accutase / Accumax 使用文献リスト

Accutase / Accumaxの使用文献リストはこちらをご覧下さい。

組織・培養細胞の剥離／分離／分散溶液「Accutase」のFAQ

Accutase / Accumaxに関するFAQはこちら。

組織・培養細胞の剥離／分離／分散溶液「Accutase」の価格表

マイリストを確認？

[在庫： 2015年10月13日 23時00分現在]

メーカー	商品コード	商品名	包装	価格	在庫	リスト
ICTイノベーティブセルテクノロジーズ Innovative Cell Technologies, Inc. データシート	AT104	Accutase	100ml	\3,800	2個以上	済追加
ICTイノベーティブセルテクノロジーズ Innovative Cell Technologies, Inc. データシート	AT104-500	Accutase	500ml	\12,000	2個以上	済追加
ICTイノベーティブセルテクノロジーズ Innovative Cell Technologies, Inc. データシート	AT106	AccutazeLZ-Lyophilized Accutase (500ml)	1vial	\17,000	2個以上	済追加